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    使用檢測(cè)試劑盒一般會(huì)遇到哪些問題?

    發(fā)布時(shí)間: 2022-12-23  點(diǎn)擊次數(shù): 520次
      檢測(cè)試劑盒保持了傳統(tǒng)ELISA法的快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn),并讓實(shí)驗(yàn)過程更簡(jiǎn)單更輕松,我司為生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一,好品質(zhì)敢承諾,所有產(chǎn)品有任何質(zhì)量問題,全部可免費(fèi)包換(除人為因素外)。
     
      實(shí)驗(yàn)原理:
      檢測(cè)試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。用純化的待測(cè)物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測(cè)物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測(cè)物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)濃度。
     
      檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本搜集:
      1、標(biāo)本搜集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),若不能馬上進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)防止反復(fù)凍融。
      2、血清:運(yùn)用不含熱原的試管,操作過程中防止任何細(xì)胞刺激,搜集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心腸別離。
      3、血漿:3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
      4、細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
      5、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
      6、保存:假如樣本搜集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,防止反復(fù)凍融,在室溫下解凍并保證樣品均勻地充沛解凍。
     
      檢測(cè)試劑盒常見問題解析:
      1、加樣量紛歧致?
      解決方法:樣品稀釋前應(yīng)充沛混勻,盡可能運(yùn)用同一移液器并裝緊吸嘴。
      2、樣品數(shù)量多少紛歧,加樣時(shí)刻有長(zhǎng)有短?
      解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)刻盡可能與初次接近。
      3、保溫時(shí)刻紛歧致,洗刷條件紛歧致,操作人員紛歧致?
      解決方法:重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與前次保持一致,以掃除這些要素造成的紛歧致的可能性。
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